Gær-transgenesekit: Ekspression af et fluorescensprotein

Dette sæt tilbyder en ny, meget forenklet protokol, der gør det muligt at udføre genoverførsel mellem arter. Ved transgenese vil genet, der koder for det fluorescerende protein fra vandmændenes bioluminescerende væv, blive udtrykt af gæren S. cerevisiae.

En ultrasimpel transformationsprotokol tilpasset skolemiljøet! Jeulin har designet en protokol, der ikke kræver, at cellerne er kompetente. Alt du skal gøre er at resuspendere friske gærceller fra en koloni, blande plasmid-DNA’et med transformationsopløsningen, omrøre (hvirvel) og derefter lade det inkubere i 30 minutter ved 42°C. Gæren dyrkes derefter for at verificere effektiviteten af overførslen, og ekspressionen af bioluminescensgenet afsløres ved at belyse skålene med UV-stråling.

Format: 15 tests
Eksperimentets varighed: 120 min + 1 session med aflæsning af resultaterne
Holdbarhed: 1 måned
Opbevaringsbetingelse: + 4°C (DNA-mikrorør ved -20°C ved lang opbevaring)

Sættet består af:
– Gærstamme på fad (x1)
– Forarbejdningsopløsning (1,9 ml)
– 1 plasmid DNA-mikrorør (80 μl)
– 1 bærer-DNA-mikrorør (78 μl)
– 1 YPD klar-til-støbt medium (200 ml)
– 1 URA klar til at hælde selektivt medium- (200 ml)
– 30 x 55 mm
petriskåle- 15
såriver – 15 sterile pinde
– 15 sterile mikrorør til forarbejdning
– 1 steril 90 mm petriskål (til dyrkning før laboratoriet)